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2015-2016学年高二生物中图版选修一课件第六章蛋白质和DNA技术 本章整合.ppt


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专题一
实验 原理 实验 过程 实验 结果 实验 意义

PCR 技术与分离蛋白质的比较
分离蛋白质 依据相对分子质量的大小不同或 带电性质差异来分离蛋白质 点样→电泳→染色→脱色→制干 胶板 相对分子质量或带电性质不同的 蛋白质得以分离 为蛋白质的研究和利用提供了原 材料

PCR 技术 利用 DNA 热变性原理 体外扩增 DNA 高温变性→低温复性 →中温延伸 获得大量 DNA 解决了 DNA 研究中材 料不足的问题

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专题二
性质 溶度

蛋白质分离方法的归纳
特点 调节混合蛋白质溶液中的中性盐溶液浓度,可 使各种蛋白质分段沉淀;主要影响因素有温度、 pH 和蛋白质浓度 蛋白质在静电状态时颗粒之间的静电斥力最 小,溶解度最小,最易形成沉淀物;各种蛋白质的 等电点不同,可调节溶液 pH 达到某蛋白质的等 电点;此法一般与盐析法结合使用 在含有蛋白质的混合液中加入一定量的溶于水 的有机溶剂,可使多数蛋白质溶解度降低并沉 淀析出,此法分离率比盐析高,但蛋白质易变性, 应在低温下进行
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蛋白质的分离应根据不同的性质选择合适的分离方法。 分离方法 蛋白质的 盐析 等电点 沉淀法 溶度 低温有 机溶剂 沉淀法

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透析和 超滤 分子 大小

离心法

凝胶过 滤层析

透析法是利用半透膜将分子大小不同 的蛋白质分开;超滤法是利用高压力或 离心力,使水和其他小分子溶质通过半 透膜,而蛋白质留在膜内,从而达到分离 的目的。 此法可选择不同孔径的滤膜截 留不同分子量的蛋白质 主要包括差速离心法和速度区带离心 法(离心沉降法),主要根据蛋白质分子 大小、形状不同来分离 这是根据分子大小分离蛋白质混合物 的最有效方法之一,此法又称分子筛层 析,比“网眼”大的不能进入网格,小的进 入内部
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所 带 电 荷

电泳 离子交 换层析 凝胶过 滤色谱法

色 谱

离子交换 色谱法 亲和 色谱法

在外界电场的作用下,带电粒子在电场中向 与其自身所带电荷相反方向移动的现象;具 有简单、快速、分离清晰、灵敏度高、样 品用量少等优点,被广泛应用 根据物质的酸碱度、极性及分子大小的不 同进行分离的层析技术 在存在多种离子、去污剂、尿素、盐酸胍、 高或低离子强度、常温或低温条件下进行, 适用于各种复杂的环境 通常包括吸附、吸收、扩散、穿透、静电 引力等复杂的物理化学过程 可在温和条件下操作,纯化过程简单、 快速、 分辨率高,对分离含量极少且性质不稳定的 生物活性物质极为有效
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