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z染料常用药品试剂精简



一、生物标本常用染料性能简介 (一)天然染料 1、苏木精 苏木精是从南美的苏木(热带豆科植物)干枝中用乙醚浸制出来的一种色素,是最常用的染料 之一。苏木精不能直接染色,必须暴露在通气的地方,使他变成氧化苏木精(又叫苏木素)后才能使用, 这叫做“成熟” 。苏木精的“成熟”过程需时较长,配置后时间愈久,染色力愈强。被染材料必须经金属盐 作媒剂作用后才有着色力。所以在配制苏木精染剂时都

要用媒染剂。常用的媒染剂有硫酸铝按、钾明矾和 铁明矾等。 苏木精是淡黄色到锈紫色的结晶体,易溶于酒精,微溶于水和甘油,是染细胞核的优良材料,他能把细胞 中不同的结构分化出各种不同的颜色。分化时组织所染的颜色因处理的情况而异,用酸性溶液(如盐酸— 酒精)分化后呈红色,水洗后仍恢复青蓝色,用碱性溶液(如氨水)分化后呈蓝色,水洗后呈蓝黑色。 2、洋红 洋红又叫胭脂红或卡红。一种热带产的雌性胭脂虫干燥后,磨成粉末,提取出虫红,再用明矾处 理,除去其中杂质,就制成洋红。单纯的洋红不能染色,要经酸性或碱性溶液溶解后才能染色。常用的酸 性溶液有冰醋酸或苦味酸,碱性溶液有氨水、硼砂等。 洋红使细胞核的优良染料,染色的标本不易褪色。用作切片或组织块染都适宜,尤其适宜于小型材料的整 体染色。用洋红配成的溶液染色后能保持几年。洋红溶液出现浑浊时要过滤后再用。 (二)人工染料 人工染料,即苯胺染料或煤焦油染料,种类很多,应用极广。它的缺点是经日光照射容易褪色,苯胺蓝、 亮绿、甲基绿等更易褪色。在制片中注意掌握酸碱度,并避免日光直射,也能经几年不褪色。 1、酸性品红 酸性品红是酸性染料,呈红色粉末状,能容于水,略溶于酒精(0.3%) 。他是良好的细胞制染 色剂,在动物制片上应用很广,在植物制片上用来染皮层、髓部等薄壁细胞和纤维素壁。他跟甲基绿同染, 能显示线粒体。 组织切片在染色前先浸在带酸性的水中,可增强它的染色力。酸性品红容易跟碱起作用,所以染色过度, 易在自来水中褪色。 2、刚果红 刚果红是酸性染料,呈枣红色粉末状,能溶于水喝酒精,遇酸呈蓝色。他能作染料,也用作指 示剂。他在植物制片中常作为苏木精或其他细胞染料的衬垫剂。他用来染细胞质时,能把胶制或纤维素染 成红色。在动物组织制片中用来染神经轴、弹性纤维、胚胎材料等。刚果红可以跟苏木静作二重染色,也 可用作类淀粉染色,由于他能溶于水和酒精,所以洗涤和脱水处理要迅速。 3、甲基蓝 甲基蓝是弱酸性染料,能溶于水和酒精。甲基蓝在动植物的制片技术方面应用极广。他跟伊红 合用能染神经细胞,也是细菌制片中不可缺少的染料。它的水溶液是原生动物的活体染色剂。甲基蓝极易 氧化,因此用他染色后不能长久保存。 4、固绿 固绿是酸性染料,能溶于水(溶解度为 4%)和酒精(溶解度为 9%) 。固绿是一种染含有浆质的 纤维素细胞组织的染色剂,在染细胞和植物组织上应用极广。他和苏木精、番红并列为植物组织学上三中 最常用的染料。 5、苏丹Ⅲ 苏丹Ⅲ是弱酸性染料,呈红色粉末状,易溶于脂肪和酒精(溶解度为 0.15%) 。苏丹Ⅲ是脂肪染 色剂。 6、伊红 这类染料种类很多。常用的伊红 Y,是酸性染料,呈红色带蓝的小结晶或棕色粉末状,溶于水(15 摄氏度是溶解度达 44%)和酒精(溶于无水酒精的溶解度为 2%) 。伊红在动物制片中广泛应用,是很好的 细胞质染料,常用作苏木精的衬染剂。 7、碱性品(复)红 碱性品红是碱性染料,呈暗红色粉末或结晶状,能溶于水(溶解度 1%)和酒精(溶解 度 8%) 。碱性品红在生物学制片中用途很广,可用来染色胶原纤维、弹性纤维、嗜复红性颗粒和中枢神经 组织的核质。在生物学制片中用来染维管束植物的木质化壁,又作为原球藻、轮藻的整体染色。在细菌学 制片中,长用来鉴别结核杆菌。在 尔根氏反应中用作组织化学试剂,已核查脱氧核糖核酸。 8、结晶紫 结晶紫是碱性染料,能溶于水(溶解度 9%)和酒精(溶解度 8.75%) 。结晶紫在细胞学、组织 学和细菌学等方面应用极广,是一种优良的染色剂。他是细胞核染色常用的,用来显示染色体的中心体,

并可染淀粉、纤维蛋白、神经胶质等。凡是用番红和苏木精或其他染料染细胞核不能成功时,用它能得到 良好的结果。用番红和结晶紫作染色体的二重染色,染色体染成红色,纺锤丝染成紫色,所以也是一种显 示细胞分裂的优良染色剂。用结晶紫染纤毛,效果也很好。用结晶紫染色的切片,缺点是不易长久保存。 9、龙胆紫 龙胆紫是混合的碱性染料,主要是结晶紫和甲基紫的混合物。在必要是,龙胆紫能跟结晶紫互 相替用。医药上用的紫药水,主要成分是甲基紫,需要时能代替龙胆紫和结晶紫。 10、中性红 中性红是弱碱性染料,呈红色粉末状,能溶于水(溶解度 4%)和酒精(溶解度 1.8%) 。它的 碱性溶液中呈现黄色,在强碱性溶液中呈蓝色,而在弱酸性溶液中呈红色,所以能用作指示剂。中性红无 毒,常做活体染色的染料,用来染原生动物和显示动植物组织中活细胞的内含物等。陈久的中性红水溶液, 用作显示尼尔体的常用染料。 11、番红 番红是碱性染料,能溶于水和酒精。番红是细胞学和动植物组织学生常用的染料,能染细胞核、 染色体和植物蛋白质,示维管束植物木质化、木栓化和角质化的组织,还能染孢子囊。 12、亚甲蓝或美蓝 亚甲蓝或美蓝是碱性染料,呈蓝色粉末状,能溶于水(溶解度 9.5%)和酒精(溶解度 6%) 。亚甲蓝是动物学和细胞学染色上十分重要的细胞核染料,其优点是染色不会过深。 13、甲基绿 甲基绿是碱性染料。它是绿色粉末状,能溶于水(溶解度 8%)和酒精(溶解度 3%) 。甲基绿 是最有价值的细胞和染色剂,细胞学上常用来染染色质,跟酸性品红一起可作植物木质部的染色。 二、常用药品试剂和培养基的配制 (一)反应剂 1、检查葡萄糖试剂 配方一 本尼迪克(Benedict)溶液 (1) 在 400 毫升蒸馏水中溶解 85 克柠檬酸钠和 50 克无水碳酸钠。 (2) 在 50 毫升加热的蒸馏水中溶解 8.5 克硫酸铜。 把硫酸铜溶液缓缓倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中,边加边搅拌,如果产生沉淀,要过滤。本尼迪克溶液配制 后能长期使用(存放时间较久而产生沉淀是,取上层清液使用,不必重新配制) 。 本尼迪克溶液用来测试食物、血液和尿中的葡萄糖,可测出 0.15 ~0.20%的葡萄糖。这种溶液跟未知物同 加热时,如果未知物中有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 配方二 裴林(Fehling)溶液 (1)把 34.5 克硫酸铜溶于 500 毫升蒸馏水中。 (2)把 125 克氢氧化钾(钠)和 173 克酒石酸钾钠溶解在 500 毫升蒸馏水中。 上述两种溶液应分别保存。在检测葡萄糖时,使他们等量的混合,加入待测物的试管内,加热到沸腾。如 果有葡萄糖,会形成红色的氧化亚铜沉淀物。 2、检查淀粉的试剂 鲁哥氏(Lugol’s)溶液(碘液) 碘液用来测试食物样品或叶片中的淀粉,也用作染色剂,例如可染色鞭毛、纤毛和细胞核等。 3、检查蛋白质的试剂 配方一 米伦(Millon)试剂 在 60 毫升浓硝酸(比重 1.42)中溶解 40 克汞(水浴加温可助溶) ,溶解后加入两倍体积的蒸馏水稀释,静 置澄清后,取它上层的清液备用。这种试剂可长期保存。 在待测物中加入少量米伦试剂,加热,如果有蛋白质,会出现红色。这种试剂不能用来测定尿中的蛋白质。 配方二 双缩尿试剂 分别配制 10%氢氧化钠溶液和 1%硫酸铜溶液。 在 3 毫升待测物中加入 1 毫升 10%氢氧化钠溶液和 1 滴 1%硫酸铜溶液。如果有蛋白质,会出现紫色反应。 4、检查脂肪的试剂 苏丹Ⅲ(Ⅳ)酒精饱和溶液 取 0.2 克苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ) ,放入纯酒精中,加热,使它充分溶解,成为饱和酒精溶液,过滤后密闭在试

剂瓶内保存备用。 5、酸碱指示剂 配方一 酚酞试剂和试纸 酚泰试剂(试纸) pH 值变色范围 8.2~10,在酸性和中性溶液中都无色,再碱性溶液中呈深红色。 配方二 红蓝石蕊试纸 红石蕊试纸在碱性溶液中变蓝,蓝石蕊试纸在酸性溶液中变红。 6、检查二氧化碳的试剂 检查二氧化碳的试剂,可用溴代麝香草酚蓝溶液和石灰水。 配方一 溴代麝香草酚蓝溶液 取 0.1 克溴代麝香草酚蓝,溶解在 100 毫升蒸馏水里,滴入少量 0.1%氢氧化钾溶液,使它成为弱碱性溶液 而呈蓝色。 溴代麝香草酚蓝溶液 pH 值变色范围是 6.0(黄)~7.6(蓝) 。待测物中如果有二氧化碳,会形成碳酸而使 溶液变成黄色。 配方二 石灰水 在蒸馏水中加入生石灰(氧化钙) ,变加边搅拌,直到加入的生石灰不再溶解,呈饱和状态时为止。在石灰 水澄清后,倾出上层清液,用滤纸过滤,放在密闭瓶内保存。 如果测定的物质中有二氧化碳,会生成碳酸钙,使石灰水变浑浊。 7、检查细胞生活力的试剂 检查细胞有无生活力, 可用中性红甲基蓝试剂。 配制的方法是先分别配制 1%中性红溶液和 1%甲基蓝溶液, 这两种溶液各取 1 份混合,用来鉴定细胞的死活。该试剂使活细胞的液泡染上红色,而使死细胞全部染成 蓝色。 (三)生理盐水 配方一 各种动物需用的生理盐水 哺乳类 需用生理盐水浓度是 0.9%。称取 0.9 克氯化钠,溶解在少量蒸馏水中,稀释到 100 毫升。 鸟类 需用的生理盐水浓度是 0.75%。称取 0.75 克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。 两栖类 需用的生理盐水浓度是 0.65%。称取 0.65 克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到 100 毫升。 配方二 任氏(Ringer’s)生理盐水 氯化钠 6.5 克 碳酸氢钠 0.2 克 氯化钾 0.14 克 磷酸二氢钠 0.01 克 氯化钙 0.12 克 此溶液用于变温动物,尤其常用于两栖类。 配方三 乐氏(Locke’s)生理盐水 氯化钠 9.0 克 碳酸氢钠 0.1~0.3 克 氯化钾 0.42 克 氯化钙 0.24 克 以上溶液用于恒温动物,尤其常用于哺乳类。 (六)染色剂 1、细菌染色剂 配方一 齐氏(Ziehl)石炭酸品红染液 甲液 取石炭酸 5 克,溶解在 95 毫升蒸馏水中。 乙液 取 0.3 克碱性品红,放入研钵中研磨,逐渐加入 10 毫升 95%酒精,继续淹没,使它溶解。 将甲液和乙液混合后,摇匀,过滤,装瓶,备用。 配方二 罗氏(Loeffler’s)美蓝染液 甲液 取 5 克美蓝,溶于 100 毫升 95%酒精中,制成美蓝—酒精饱和液。

乙液 取氢氧化钾 0.01 克(或 1%氢氧化钾溶液 1 毫升) ,溶液也可用于放线菌染色,0.1%浓度可用于酵母 菌染色。 配方三 革兰氏(Gram’s)染液 用此液染色因先用甲液染色,再加乙液固定,用丙液处理,最后用丁液复染。四种液体的配方如下: 甲液(结晶紫液) (1)结晶紫 (2)草酸铵 使用钱江(1)(2)液相混,静置 48 小时后使用。 、 乙液(碘液) 丙液 95%酒精溶液 丁液(番红花红液) 2、细菌特殊染色剂 配方一 芽孢染液 用此配方染色是用甲液染色后,用乙液复染。 甲液 取 5 克孔雀绿,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到 100 毫升,即成孔雀绿染液。 乙液 取番红花红 0.5 克,加入少量蒸馏水,使它溶解后,用蒸馏水稀释到 100 毫升,集成番红花红复染液。 配方二 荚膜染液 此配方先用甲液染色,后用乙液复染。 甲液 取结晶紫 0.1 克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到 100 毫升,再加入 0.25 毫升冰醋酸一结晶紫染液。 乙液 取硫酸铜( )31.3 克,溶于少量蒸馏水后,加水稀释到 100 毫升,即成 20%硫酸铜脱色剂。 配方三 鞭毛染液 甲液 饱和明矾溶液 2 毫升 5%石炭酸溶液 5 毫升 20%丹宁酸溶液 2 毫升 乙液 碱性品红 11 克 95%酒精 100 毫升 使用前取甲液 9 毫升和乙液 1 毫升相混,过滤即可。 3、植物细胞壁染色剂 配方一 纤维素细胞壁染液(Ⅰ) 该液能染色纤维素细胞壁,还用于动植物中作浆质染色剂。 配方二 纤维素细胞壁染液(Ⅱ) 该染液能把细胞壁染成紫色,胞质染成淡黄色,胞核染成棕色。 配方三 纤维素细胞壁染液(Ⅲ) 甲液 取 1 克碘和 1.5 克碘化钾,溶于 100 毫升蒸馏水中,即成 1%碘液。 乙液 取 7 份硫酸和 3 份蒸馏水相混,即成 66.5%硫酸溶液。 染色时,在材料上滴加甲液,再加一滴乙液,纤维素细胞壁就染成黄色。 配方四 木质化细胞壁染液(Ⅰ) 硫酸化苯胺(或盐酸话本安) 1 份 蒸馏水 70 份 95%酒精 30 份 硫酸 30 份 将上述各组分相混,将细胞材料放入混合液里染色,可是木质化细胞壁呈鲜黄或姜黄色。 配方五 木质化细胞壁染液(Ⅱ) 先在材料上滴上 1 滴浓盐酸,然后滴上间苯三酚—酒精液 1 滴,木质化的细胞壁就染上樱红或紫红色。 配方六 木质化细胞壁染液(Ⅲ) 取 1 克番红,溶于 99 毫升蒸馏水中,即成 1%番红溶液。 4、细胞质染色剂

配方一 伊红染液 伊红染液一般配用水溶液和酒精溶液两种。 (1)水可以用红墨水稀释液来代替本溶液) 。 配方二 甲基蓝染液 取 1 克甲基蓝,溶于 29 毫升 70%酒精中,加入 70 毫升蒸馏水,即成 1%甲基蓝染液。 配方三 亮绿染液 5、细胞核染色剂 配方一 甲基绿染液 本染液能染细胞核,还用来染木质化细胞壁。 配方二 龙胆紫染液 配方三 美蓝(亚甲基蓝)染液 此溶液能染细胞核,还用来染细菌、血和神经组织等。 配方四 硼砂—洋红染液 此染液能染细胞核,还用来染糊粉粒和一般动物、植物的整体染色,如水螅、血吸虫等整体标本。 配方五 德氏(Delafield’s)苏木精染液 本染液是染色体的优良染色剂,除能染细胞核外,还用来染纤维素、细胞壁和动植物组织。 配方六 席夫(Schiff’s)试剂 过滤后把滤液贮在棕色试剂瓶内,塞紧瓶塞,滤液应该是无色的。在使用时勿让溶液长时间暴露在空气中 和见光(瓶外用黑纸或暗盒遮光) 。如溶液变成红色,即失去染色能力。 碱性品红是较强的核染色剂,在孚尔根氏(Feulgen’s)反应中作为组织化学试剂,以检查 DNA。 6、染色体染色剂 配方一 醋酸—洋红染液 配方二 醋酸—地衣红染液 配方三 龙胆紫染液 配方四 甲苯胺蓝染液 7、线粒体染色剂 配方一 詹钠斯绿 B(Janu’s green 酒精饱和溶液 取 125 毫升詹钠斯绿 B,加入到 62.5 毫升无水酒精中,搅拌,即成烟鲁绿 B 酒精饱和染液。 (1)取詹钠斯绿酒精饱和染液按 1:30000 比例加蒸馏水稀释,用来染原生动物线粒体。 (2)取詹钠斯绿酒精饱和液,按 1:10000 比例加蒸馏水稀释,用来染新鲜蛙血线粒体。 配方二 詹钠斯绿 B 中性红染液 先配制詹钠斯绿 B 和中性红酒精饱和液。詹钠斯绿酒精饱和液见配方一。 在 10 毫升生理盐水(两栖类生理盐水浓度为 0.65%;哺乳类生理盐水浓度为 0.9%)中,加入詹钠斯绿 B 酒精饱和液 0.7~1 毫升,中性红酒精饱和液 2 毫升,混合。 詹钠斯绿 B 稀释液是活体染液。 8、脂肪染色剂 苏丹Ⅲ染液 这染液能染脂肪,还能染木栓、角质层。 9、血液染色剂 配方一 瑞氏(Wright’s)染液 新鲜配制的染液偏碱性,放置后呈酸性,染液贮存愈久染色愈好。这染液的适宜 pH 值是 6.4~6.8。因此, 染色时加入缓冲液,可维持一定的酸碱度,使染色效果更好。 这种染液除能染血液,还能染疟原虫。 配方二 甲基紫染液

10、吸虫染色剂 梅耶氏(Mayer’s )明矾—洋红染液 防腐剂,如麝香草酚、樟脑粉、水杨酸钠、苯酚(石炭酸) 这种染液适合于染小型动物材料,如吸虫等寄生虫的整体,也能染高等植物的表皮和蕨类植物的原叶体。 11、活体染色剂 配方一 中性红染液 本染液用来显示原生动物的食物泡以及动植物组织中活细胞的内含物等。 配方二 尼罗蓝(Nile Blue)染液 这种染液能把原生动物大核染成绿色,食物泡染成蓝色。 配方三 亚甲蓝染液 这种染液用于原生动物的活体染色。 12、透明骨骼标本染色剂 配方一 茜素红染液(Ⅰ) 配方二 茜素红溶液(Ⅱ) (七)固定液和保存液 用固定液固定动植物整体或它的一部分组织和气管等,能保存组织内细胞的形态、结构及其组成,尽量使 它近于生活状态。固定液一般有防腐和保存的作用,分为单纯固定液和混合固定液。单纯固定液中最重要 的有乙醇、福尔马林、醋酸、苦味酸、铬酸、重铬酸钾、升汞等,前两种固定液是中学生物实验室常用的。 单纯固定液的优点是简便,缺点是有一定的局限性,不易达到理想的固定要求。混合固定液有几种不同的 药液按一定的比例混合而成,使各自的优缺点相互补充,成为较完美的固定液。这种固定液的制备虽比较 麻烦,但是效果比较好。常用的混合固定液是醋酸—酒精混合液、福尔马林—醋酸—酒精液、包因氏固定 液等。 常用的保存液大致跟固定液相同,主要是福尔马林、酒精、甘油以及由这些药物按比例配制成的各种混合 液。有时按特殊保存的需要,再保存液中增加某些药品(如原生标本的保存液) 。 1、福尔马林 福尔马林在固定组织标本时杀菌能力强,所以防腐性强,渗透力大,固定得快。永福尔马林固定精细的解 剖标本时,要跟甘油、酒精、石炭酸等混合使用。 固定液常用的浓度是 5~10%(根据材料的大小、性质和数量而定) 。 保存液常用的浓度是 5~10%。用福尔马林作保存液,效果好且价格低廉。 在配制福尔马林溶液(固定液或保存液)时,应将 37~40%的甲醛作为整个溶质来配。例如配制 5%福尔 马林是取市售 37~40%甲醛溶液 5 毫升跟 95 毫升蒸馏水混合。实际上甲醛含量只有 1.9~2%,这样的配法 已成为一般实验室常用的惯例。 注意事项: (1)福尔马林业在长期贮存中会产生蚁酸,可适量的加入碳酸钙( )或碳酸镁( )等碱性物质进行中和。 (2)福尔马林业作为保存液会慢慢挥发而致使浓度降低,并且福尔马林液再保存中往往形成多聚甲醛,使 浸液变浊,影响观察。所以,根据一定保存期的情况,可适当增加福尔马林液的浓度或更换新液,以防标 本变坏。其中如有白色沉淀物,加热后可使它溶解。 (3) 市售的福尔马林液常带有酸性, 能腐蚀石灰质, 因此, 最好不用福尔马林液浸制有石灰质外壳的动物。 2、酒精(乙醇) 酒精也是常用的固定液,它有强烈的杀菌作用,对组织材料的渗透力较大,固定的快。但是,它的脱水作 用较强,在高浓度的酒精中容易使材料显著硬化和收缩。一般用于固定浸制标本材料,分一级或二级固定, 即 70%或 50%与 70%的酒精。有些小型材料或精细的解剖材料,最好用二级或三级固定,即用 50%、70% 或 50%、60%、70%的酒精,最后再进行保存。从经济效果来考虑,一般酒精应跟福尔马林液等固定液混 合使用。

市售的工业用酒精浓度是 95%左右,因此用时要重新配制。保存液的浓度通常是 70%。 注意事项: (1)在固定材料时要注意固定的效果,小型材料一般放在固定液中固定。大型材料必须先往体内注射一部 分固定液,再放入固定液中,防止材料内部腐怀变质。用福尔马林液固定也是如此。 (2)高浓度的酒精有脱水、脱脂作用。含有多量脂肪或拟脂标本(如脑、脊髓)等都不宜用较高浓度的酒 精作保存液。 (3)为了防止酒精使标本硬化,保存一些精细的材料或解剖标本时,因加入少量甘油,因为甘油具有润软 组织的作用。 (4)忌跟铬酸、锇酸和中铬酸钾等氧化剂配合。 3、醋酸 醋酸即乙酸,纯醋酸在低于 16.7 摄氏度时会凝成冰状固体,所以叫冰醋酸。醋酸能很快穿透组织,因为它 不能沉淀细胞质中的蛋白质,组织不会硬化。一般常跟酒精、福尔马林、铬酸等容易引起组织变硬和收缩 的液体混合,以起到相互抵消的作用。 醋酸固定液的常用浓度是 0.3%~5%。 4、苦味酸 苦味酸是一种黄色结晶,能溶于水(溶解度是 0.9~1.2%) 、酒精(溶解度是 4.9%)和苯(溶解度是 10%) 。 苦味酸也能沉淀一切蛋白质,穿透较慢,固定后,组织收缩明显,但不使组织硬化。 苦味酸固定液可以在 100 毫升蒸馏水中加入苦味酸约 1.5 克,制成饱和水溶液。固体苦味酸易爆,长制成 饱和水溶液保存。 5、升汞 升汞又叫氯化汞,是白色粉末,以针状结晶为最纯。通常固定时用饱和水溶液,有时也用 70%酒精作溶剂, 不单独用作固定剂。升汞的穿透力较弱,通常用于小型材料,对蛋白质有强烈的沉淀作用,硬化程度中等。 固定液用饱和溶液,浓度约为 7%。 6、卡尔氏(Carl’s)液 这时极好的昆虫保存液,常用来杀死和保存小型、身体柔软的种类入螨、蜈蚣、马陆等。在这溶液里加入 少量甘油,能防止虫体变脆。 7、卡诺氏(Carnoy’s)液 这种固定液能固定细胞质和细胞核,尤其适宜于固定染色体,所以多用于细胞学的质片,还用来固定腺体、 淋巴组织以及原生动物的胞壳等。这种固定液穿透得快,因此一般小块组织固定 20~40 分钟,大型材料不 超过 3~4 小时。固定后用 95%或纯酒精洗涤,换液两次,移到石蜡中或用 80%酒精保存。 8、吉尔桑氏(Gilson)液 这是常用的固定液,适用于肉质菌类,特别是柔软胶质状的材料如木耳等,也广泛用于无脊椎动物和一般 组织和蛙胚的固定。固定时间 18~20 小时,然后用 50%酒精冲洗材料,除去升汞。如果用水冲洗,会使材 料膨胀。混合液保存 24 小时后失效。 9、福尔马林--醋酸--酒精溶液(FAA)液 这种固定液适用于固定一般植物茎、叶组织,昆虫和甲壳类动物。液组织在这溶液里固定 12 小时,木质化 组织要固定 1 周,材料也可在此液中长期保存。固定后的材料放在 50%酒精中冲洗 1~2 次。 10、克来宁堡氏(Kleinenberg’s)液 配方 在 20%硫酸水溶液内加入苦味酸,直到饱和。 这种固定液适用于鸡胚的固定,也用于许多小型海洋生物的固定。 这是常用的良好固定剂,渗透迅速,固定均匀,组织收缩少,染色后能显示一般的微细结构。一般动物组 织、无脊椎动物的卵和幼虫以及一般组织学、胚胎学的材料,如植物组织的根尖和胚囊都可用它来固定。 一般组织固定 24~48 小时,小块组织固定 4~16 小时,动物材料能在这种固定液中长期保存。固定后,动

物材料用 70%酒精冲洗净苦味酸,到无黄色为止(用酒精冲洗时,加几滴氨水,可加快除去黄色) ;植物材 料用 20%酒精冲洗几次。 12、绍丁氏(Schaudinn’s)液 这种固定液适用于固定有鞭毛的原生动物、植物的精子和游动孢子等。材料如制作涂布装片,可在 40 摄氏 度下固定 10~20 分钟。 23、动物内脏原色保存液 先把材料放在甲液内固定,固定时间根据材料的大小而定,一般需 1~5 天。当材料失去自然色泽而呈暗褐 色时,用手轻轻挤压,直到没有淡红色血水流出时,取出材料,用清水冲洗,在浸在 85%酒精中 3~24 小 时(不能太久,否则易破坏色素) ,到血色恢复后,浸在乙液中保存。 (八)脱水剂 在显微镜制片中,生物实验室最常用的脱水剂是酒精。 (十一)消毒剂 1、酒精 70%的酒精杀菌力最强,它能使蛋白质脱水和变性,在 3~5 分钟内杀死细菌。因此,它用于消毒和防腐, 适用于皮肤和器械、塑料制品等的消毒。高浓度的酒精(95~100%)能引起菌体表层蛋白质凝固,形成保 护层,使酒精分子不易透入,因此杀菌能力反而弱。 2、碘酒 碘酒是碘和碘化钾的酒精溶液,2%的碘酒在 10 分钟内能杀死细菌和芽 孢,可用于皮肤的消毒。药房出售的一般是 2%的稀碘酒。实验室内也可自配碘酒,配方为: 3、高锰酸钾 高锰酸钾是强氧化剂,有很强的杀菌作用。0.1%水溶液用作皮肤消毒,2~5%水溶液能在 24 小时内杀死细 菌芽孢。这溶液在空气中溶液分解,失去氧化能力,要现用现配。 4、苯酚(石炭酸) 石炭酸是有效的常用杀菌剂,1%水溶液能杀死大多数的菌体,通常用 3~5%水溶液作接种室喷雾消毒或器 皿的消毒,5%以上溶液对皮肤有刺激性。在生物制品中,加入 0.5%石炭酸可作防腐剂。 5、来苏尔 来苏尔即煤酚皂溶液。它的杀菌效力比石炭酸大 4 倍,通常以 1~2%溶液用于手的消毒(浸泡 2 分钟)和 无菌室内喷雾消毒,5%溶液多用于各种器械和器皿的消毒。 6、新洁尔灭 新洁尔灭是常用的消毒剂,主要用于皮肤、医疗器械、器皿、接种室空气等的消毒灭菌,对许多非芽孢型 病原菌、革兰氏阳性菌和阴性菌经几分钟接触即灭菌,尤其对格兰氏阳性菌杀菌力更大。本品原液的浓度 是 5%,通常用 0.1~0.25%水溶液。用新洁尔灭消毒金属器械时,要在 1 升溶液中加入 5 克亚硝酸钠,以 防生锈。 7、福尔马林 福尔马林是常用的杀细菌、真菌剂。它的 2~5%水溶液能在 24 小时内杀死细菌芽孢,常用来消毒器皿和器 具。如果用作无菌室等房屋消毒,取 100 毫升福尔马林,放在盆内,用小火微热,促使蒸发,在 10 小时内 可消菌 3 立方米左右体积房屋的空气。 (十四)密封剂 1 石蜡封瓶剂 配方 石蜡(熔点 52 度)1 份; 松香 1 份;甘油 数滴 把上述配方中各组分别加热熔化。擦干瓶口和玻璃瓶盖,把瓶盖浸入热的石蜡液中。在瓶口也涂上热的石 蜡液,塞紧后,把标本瓶倒过来,轻轻地放在熔融了的蜡液中,到瓶口突出的外缘全部浸入为止。再迅速 地把瓶提出来。瓶口密封后,瓶盖上覆一块纱布,上面再覆一块圆形透明的塑料薄膜,用线扎紧,即完成

瓶封。 (十五)其他配方 1、缓冲液(用于瑞氏染液) 1%磷酸二氢钾 30 毫升 1%无水麟酸氢二钠 20 毫升 蒸馏水 加到 1000 毫升 2、重铬酸钾洗液 重铬酸钾 20 克 水 100 毫升 浓硫酸(粗制) 100 毫升 配取时先把重铬酸钾溶于 100 毫升水中,然后慢慢加入浓硫酸,切不可把水倒入浓硫酸中。 3、抗凝血剂 配方一 草酸钾 2 克 氯化钠 6 克 蒸馏水 100 毫升 在 10 毫升血液中加入 1 毫升抗凝血剂 配方二 在 10 毫升血液中加入 0.2 克柠檬酸钠 4、红细胞保存液 配方 柠檬酸钠 2.2 克 柠檬酸 0.8% 葡萄糖 2.45 克 蒸馏水 加至 100 毫升 取上述保存液 75 毫升跟 500 毫升新鲜血液相混。 5、血细胞稀释液 配方一 红细胞稀释液 氯化高汞 0.25 克 硫酸钠 2.5 克 氯化钠 0.5 克 蒸馏水 加至 100 毫升 这种稀释液用于红细胞计数。在这溶液中加入 0.05 克曙红 B 后,常作为血涂片的染色剂。使用时,取 1 份 血液跟 100 份这种染色剂混合。 配方二 白细胞稀释液 冰醋酸 1.5 毫升 1%龙胆紫 1 毫升 蒸馏水 加至 100 毫升 6、甘油蛋白粘剂 打破两只鸡蛋,倒入烧杯内,取出蛋黄,留下蛋白,用筷子调打成雪花状泡沫,然后用粗滤纸或双层纱布 过滤。在滤出的透明蛋白液内加入等量的甘油,混合均匀后,加入少量麝香草酚(1:100)作防腐用。



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