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纯生啤酒厌氧菌检测技术探讨



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海峡 预 防医 学 杂 志 2 0 年 第 1 第 1 06 2卷 期  SriJP e  d2 0  11  o 1 tat   rvMe 0 6Vo. 2N .   

49  

文章 编 号 :0 720 I0 6 0 —0 90  中 图分 类 号 :R 1

5 5 文 献标 识 码 :A 10 —75  0 )10 4—2 2  5 .  

【 验 研究 】 实  

纯 生 啤酒 厌 氧 菌检 测技 术 探讨 
陈惠珍  骆 建祥。 ,  

摘要 : 目的]探 索一种 既方便 , [ 灵敏度又高 , 能适合 啤酒中厌氧 菌生长繁殖, 能抑制酵 母菌 生长 的选 择性培 养基 与 又   培养装置 。[ 法]用乳酸菌和酵母菌分 别接种在 UB 和 NB - 方 A B A两 种不 同的培养 基, 比较在 厌氧条 件培 养下 的计 数结  果 。比较 同一试样在厌氧工作站和厌氧罐 两种不 同培养装置培 养下 的计 数结果。[ 结果]两种培养 基都 能 抑制酵母 菌 生  
长 , 厌氧 菌 无 影 响 , 数 结 果 基 本 一致 。 同一 试 样 在 厌 氧 工 作 站 检 出 的厌 氧 菌 高 于 厌 氧 罐 。 [ 论 ]在 培 养 基 操 作 方 面 对 计 结  

NB BA 培养 法更方便 于 UB A培养 法。在培养装置 方面厌氧 工作 站优 于厌氧罐, 使用方便 , 工作客量 大, 厌氧 菌培养 率高,  
是 实验 室检 测 厌 氧 茵 的理 想 设 备 。  

关键词 : 食品卫生 ;纯生啤酒 ; 厌氧菌检测 
纯生啤酒是指不经 巴氏灭菌法或 瞬时高 温灭菌 , 采用 物理  过滤方法除菌 , 达到一定 生物 稳定性 的啤酒 。其 生产过程 一旦  受到污染 , 没有后 杀菌工艺 , 质量很难保 证 , 而厌氧菌 的污染危 
害更 大 , 使 其 质 量 在 短 时 间 内 发 生 改 变 。因 此 在 纯 生 啤酒 的 会   厌氧工作站 。  
l2 l    方 法 

1 2 1 菌液的制备 . .  cu m1作 以下实验 。 f/ )  

将上述各菌种按 消毒 技术规 范l 菌悬 液  l  

制 备 方 法 制 备 与 计 数 , 择 适 宜 稀 释 度 ( 菌 量 4 O ~ 5 1  选 含 ×1  × 0 1 2 2 U A 培 养 基 计 数 法  取 菌 液 各 1ml 无 菌 平 皿 , . .  B   于 将 

有害菌检测 中, 厌氧菌 是一个 十分重 要的指标 。如何正 确选择  厌氧菌培养材料及培养 装置 , 有效控制纯生 啤酒微生物 , 稳定产 
品质 量 , 纯 生 啤 酒 微 生 物 检 测 的 关 键 之 一 。 为 此 我 们 选 用  是
UB 和 N BA 两 种 不 同成 份 的 培 养 基 和 厌 氧 工 作 站 、 氧 罐  A B- 厌

UB A培养基融化后冷却至 6 ℃按 1 3培养基量加入成 品啤酒 , 5 /  
冷 却 至 5 ℃时 加 1 p 无 菌 放 线 菌 酮 , 匀 后 倒 入 各 种 菌 样  O 0p m 摇 的平 皿 中 , 匀 凝 固 后 置 厌 氧 环 境 中 3 ℃恒 温 培 养 5d 观 察 结  摇 O  ,
果。  

两种不 同培养装置对计数结果进行 比较 , 现将结 果报 告如下:  
1 材 料 与 方 法   
1 1 实验 材料  .

12 3 N BA 培养 基 计 数 法  取 菌 液 各 1ml 无 菌 平 皿 , . .  B -   于 将 

NB - B A培养基融化后冷 却至 5 ℃ , 入各 种菌样 的培 养皿 中 , O 倒  
凝 固后 置 厌 氧环 境 中 3 ℃ 培 养 5d 观 察 结 果 。 O  ,   12 4 厌 氧 工 作 站 培 养 法 分 别 取 上 述 变 质 啤 酒 样 品 1ml . .    于 

1 1 1 试 验 样 品及 菌 种  取 市 场 上 已 发 生 生 物 浑 浊 的 啤 酒 5 . .   

份 。乳 酸 杆 菌 ( I C 0 2 、 酸球 菌 ( IC 0 8 购 于 中 国工 业  C C 6 3 )乳 CC 63)

微生 物菌种保藏 中心 。啤酒酵母 由惠安啤酒集 团股份有 限公 司  
提供 。  

无菌平皿 , 已溶 化 5 ℃的 N BA 培养 基 倒入 平 皿 , 将 O B ̄ 混匀 , 凝 
固后 放 在 厌 氧工 作 站 的 隔 离 室 , 3次抽 真 窑 , 经 2次充 氮气 , 次  1
混 合 气 体 , 造 无 氧 环 境 。 然 后 打 开 内 门 把 样 品 放 入 培 养 室  制

1 12 培 养 基 和 试 剂  NB - 培 养 基 购 于 广 州 宝 莱 公 司 。 . .  BA   U A 培 养 基 实 验 室 自配 : 茄 汁 10ml葡 萄 糖 1  , 脂 2  B 番 2  , 0g 琼 8
g 蛋 白胨 1  , 5g和 蒸 馏 水 60 m  p 用 乳 酸 调 节 ) . ~4 5  3  l H( 42 . 。

3 ℃恒 温 培 养 5d观 察 结 果 。 O     12 5 厌 氧 罐 培 养 法 . .  将 接 种 样 品 的 平 皿 装 入 厌 氧 罐 , 厌  在 氧罐 里 放 厌 氧 发 生 袋 , 氧 指 示 剂 , 氧 催 化 剂 , 紧 盖 子 。置  厌 厌 盖 3 ℃恒 温培 养 5d观 察 结 果 。 O    

0 1MP .  a灭菌 2  i。10mg ml 菌放 线菌酮浓缩液。新 鲜  0r n .  / 无 a
成 品 啤酒 。  

1 1 3 设备和材料 . . 

厌氧发生袋 、 氧指示 剂和厌氧催 化剂 。 厌  
2 结 果   

混 合 气体 : N2 4 9  H 1. 7 和 C 2 . 5 ( 锡 市 科  含   .8 8 0 0  O  9  无 4

学气体产 品公 司生产 ) 。双相压力计的厌氧罐 。F r 公 司的  oma
第 一 作者 简 介 :陈 惠 珍 ( 9 8 ) 女 , 管 检 验 师 。 主 要 从 事 微 生 物 检  15 , 主
验工作。  

2 1 乳 酸菌和酵母 菌在 2种 培养基 计数 比较  同一菌 样分别  . 
接 种 于 UB 培养 基 和 NB - 培 养 基 , 同 一 厌 氧 环 境 培 养 条  A BA 在

件下, 计数结果基本一致  2种培 养基均 对厌 氧菌 敏感 ( 回收  菌
率 均 在 9  以 上 ) 同 时 都 能 抑 制 酵母 菌 ( 1 。 O , 表 )   2 2 2种 不 同装 置厌 氧 菌 计 数 比 较  同 一 试 样 在 厌 氧 工 作 站  .  检出的厌氧菌高于厌氧罐( 2 。 表 ) 

作者单位:1 .泉州市卫生防疫站,福建 3 2 0 .惠安县疾病预 防控  6 00;2
制 中心 ,福 建 3 2 0 。 6 i0 

0 9 5  ,=2 9  置信 度 ) 测 量结 果 表 述为 ( . 1 . 2  . 9 9g k ( 5 , 0 1 士0 0 )
mg k   / g。

确 定 度 较 小 , 本 可忽 略 。 基  
参考文献 :   [ ]李慎安 , 1 郭兰典 .商品检验不确定度评定释例 [ .北京 t M] 中国计 量 
出 版 社 ,0 2 14 19 2 0 ,2 2 .   收 稿 日期 :0 50  6 修 回 日期 :0 51 一8 2 0  92 ; 2 0 —l2 

用 氢 化 物 发 生 原 子 荧 光 光 谱 法 测 定 酱 油 中 铅 , 确 定 度 主  不

要来源于由标 准曲线求 z 产生的不确定 度 , 。 即主要来源 于配制 
标 准 系 列 , 上 机 测 定 所 带 来 的不 确 定 度 , 它 因 素 所 带 来 的 不  及 其

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5  0

海 峡预 防 医学 杂 志 2 0 0 6年 第 1 第 l期 2卷

SriJP e  d2 0  11  .  tat   rvMe 0 6Vo. 2No 1  

文 章 编 号 :072 0 ( 0 6 0 —0 00 中圈 分 类 号 :R 7 9 R 98 1 文 献标 识 码 :   10 —7 5 2 0 )10 5—2   5 ;   7.  B

【 验研 究 】 实  

4 8例支 原 体 感 染药 敏 试 验 结 果分 析  3
庄 圣荷 

摘要 :[ 目的]了解本地 区支原体耐 药情况 , 指导临床用 药 [   方法]经 支原体培 养、 离和鉴定 , 分 检测 9种抗生 素的耐 
药性。[ 结果]平均 耐 药率依 次 是交 沙 霉 素 1 6 、 满 霉 素 1.  、 力 霉素 1 .  、 氧 氟 沙 星 1 .  、 巴沙 星 .  美 12 强 16 左 74 司   2 .  、 1O 罗红霉素 3 .  、 2 2 阿奇霉 素 3 .  、 3 8 氧氟沙 星 3 .  、 4 9 克林 霉素 7 .  。[ 47 结论 ]交沙霉 素、 美满霉 素和强力 霉素 
是 治 疗 支原 体 感 染 的 首 选 药 物 。  

关键词 : 支原体 感染 ; 药敏试验 ;耐药性 ; 抗生 素 
支 原 体 是 非 淋 菌 性 尿 道 炎 ( U) 常 见 病 原 体 之 一 , 年  NG 的 近 随 着 广 谱 抗 生 素 的 广 泛 使 用 , 原体 耐药 菌 株 日渐 增 多 , 药 在  支 耐 各地区差异较大r   为 了解 南 平 地 区支 原体 感染 及 耐 药 情 况 ,  

性伴 和家人 。资料完 整的 4 8例 中 , 2 2例 (6 1 ) 女 2 6 3 男 0 4 .  , 3 
例 (4 9 ) 年 龄 4 7 5 .  ; ~ O岁 , 均 3 . 平 1 4岁 。   12 标本采 集    标 本 采 集 前 , 者 应 停 止 使 用 全 身 及 局 部 抗  患

本 中心皮肤性病 门诊 2 0 年 9 02 月至 2 0 0 4年 9月对 4 8例支原  3 体培养 阳性标本进行耐药试验 , 结果 分析如下 :  
1 资 料 和 方 法   

生素 1 以上 。男性患 者禁排尿 2h以上 , 周   用拭 子由前尿道 2 ~  4c 处取分泌物 ; 性 患者先 清洁 宫颈 口分泌 物 ,  m 女 用拭子 在宫 
颈 管 内 1  m 处 取 分 泌 物 , 子 应 在 宫 颈 ( 尿 道 ) ~2c 拭 或 内旋 转 并  至 少 停 留 2  以 上 , 出 时不 触 及 阴 道 壁 。及 时 将 标 本 接 种 到  0s 取
培养基 。  

1 1 资料来源  来 自中心皮肤性病门诊就诊的患者及配偶 、 .   
作 者 筒 介 :庄圣 荷 ( 9 2 ) 男 , 1 5  , 中专 , 治 医 师 。从 事皮 肤 性 病 临床 工  主
作 

1 3 试 剂  检 测 试 剂 采用 珠 海 黑 马 生 物 工 程 有 限 公 司 的 支 原  . 

体分离 、 签定 、 计数 、 药敏 试剂盒 。药 敏试验 药物分 别为罗 红霉 
素、 阿奇霉素 、 氧氟 沙星 、 左 交沙霉索 、 司伯沙星 、 强力霉 素、 美满 
霉素 、 氟沙星 、 氧 克林 霉 素 。  

作 者 单 位 :南平 市疾 病 预 防控 制 中心 ,福建 3 30 。 5 0 0 

裹 1 2种 培 养基 对 乳 酸 菌和 酵 母 菌 种 计 数 结 果   

据啤酒生产 厂家 的经 验选 用 UB 与 NB - A B A培 养基 作计 数 比  较, 结果发现 2种 培养 基均 对厌 氧 菌敏 感 , 都能 抑 制啤酒 酵母  菌 , 数结果基本 一致 。但 从操 作方 面 , B - 培养 基培 养法  计 N BA 比 UB A简单方便 , UB 培养法 中, 因 A 培养 基融 化后 要加 成品  啤酒 , 若温度控制不好 , 会使 培养基 重新凝 固。同时 , 加入 培养  基 中的啤酒要经过热 杀菌保证 绝对无菌 , 否则会 引起 检测误差。   在加放线菌 同时也要 非 常小心 。因为放线 菌酮不耐 高温 , 需用  无菌过滤 。过滤 时要 保证 绝对 无菌 , 到培 养基时 , 加 温度要控制  在 5 ℃左右, o 若温度 太高 , 线菌酮 受 到破坏 就达 不到抑 制酵  放 母的作用 。因此 , 建议使用 NB - BA培养基 , 会更方便些  同一试样在厌氧 工作站检 测的 厌氧菌 高于厌氧 罐 , 因为厌  氧工作站 的培养环境 优于厌氧罐。厌氧工作站样品从隔离室进  入培养室 只需几分钟 , 而厌 氧罐是 通过反 应袋将 氧除掉 而达到  厌氧环境 。而使用反 应袋 制造无 氧环 境需 要 10mi 5  n以上, 这 

注 : 内 数 字为 5次 实 验 结 果 。 表  

裹 2 2种培养装置 同一式样菌落计数结果(f/ )   cu m1  

注 : 内 数 字为 5次 实 验 结 果 。 表  

就 影 响 到专 性 厌 氧 菌 的检 测 。再 者 厌 氧 工 作 站 使 用 方 便 , 作  工 容 量 大 , 过 菌 落 观 察 及 鉴 定 , 以 判 断 所 污 染 的 菌 是 否 对 啤 酒  通 可

3 讨 论   

厌 氧 菌 在 自然 界 广 泛 分 布  纯 生 啤 酒 通 过 膜 过 滤 除 菌 , 灌  装 时 酒 液 与 瓶 盖 、 瓶 和 管 道 等 设 备 直 接 接 触 , 发 生 二 次 污  空 易

有害 。且可 以准确地 将专性厌 氧菌 检测 出来 , 实验室检 测厌  是
氧 菌 的理 想 设 备 , 得 推 广 使 用 。 值  
参考文献 :   [ ]中 华人 民 共 和 国卫 生 部 .消 毒 技 术 规 范 [ ] 2 0 。53 . 1 s . 0 2 1 —0   [ ]巴 桂荣 , 玉 梅 , 胜 涛 .啤 酒 生 产 过 程 中 厌 氧 菌 的 危 害 与 控 制  2 李 苏 L] 啤 酒 科 技 ,0 0 ( ) 4 J. 20 。8 :.  

染, 尤其是厌 氧菌枵染 。因 啤酒含氧量较 低 , 且含有抑制微 生物  生长的酒花等物质 , 不适 宜需 氧菌生 长。故能在 啤酒 中生 长的 

微生物常是厌氧或微需氧的微生物, 如乳酸菌、 足球菌等,   会引
起啤酒 酸败 、 变混 、 粘和 双乙酰反 弹 ] 给质量 带来很 大 的影  发 ,
响 。因 此 生 产过 程 中 应 加 强 各 环 节 及 成 品 酒 微 生 物 指 标 检 测 ,  
特 别是 厌 氧 菌 检 测 

目前对 啤酒 中厌 氧菌 的检测尚未制定具体 的方法 。我们 根 

收稿 日期 :0 50  0 修 回 日期 :0 5 1—6 2 0  92 ; 20 —20 



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