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浙科版选修三 12 基因工程的原理和技术(课件)



温故而知新 限制性核酸内切酶 dna 连接酶 质粒——载体 基因工程操作的工具 基因工程的原理和技术 1、筛选含有目的基因的受体细胞 2、目的基因的表达 步骤一 获得目的基因 人工合成 利用 pcr 技术扩增 已知序列: 从基因文库获得 未知序列: ( dna library ) 聚合酶链式反应(polymerase chain reaction) 氢键断裂,形成单链 dna。

引物与 dna 模板结合,形成局部双链。 在酶的作用下,不断延伸,合成双链 dna。 多次循环,获得大量双链 dna 分子。 pcr 技术扩增 鸟枪法:散弹射击法 从基因文库获得 人工合成法 逆转录法 根据已知氨基酸序列直接合成 dna 步骤二 形成重组 dna 分子 步骤三 将重组 dna 分子导入受体细胞 1.基因工程中常用的受体细胞有哪些? 2.导入过程如何? 大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞 借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径 步骤四 筛选含有目的基因的受体 利用标记基因来筛选: 通过检测标记基因的有无, (或利用标记基因体现的性状) 来判断目的基因是否导入受体细胞。 对目的基因进行分子水平的检测: 通过合成标准探针,利用 dna 杂交技术来进行目的基因的检测。 步骤五 目的基因的表达 1、通过鉴定目的基因的产物蛋白来确定目的基因的表达。 2、目的基因导入受体细胞后,受体细胞(或受体细胞发育来的生物体)会表现特定的性状, 通过性状的观察来确定目的基因的表达。



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